Principe :
La créatinine forme un complexe photomètrable avec le picrate alcalin.
Un dosage cinétique permet de s'affranchir des interférences.

Prélèvement :
Prélèvement d'urine ou de sang veineux avec ou sans anticoagulant.

Technique : il est conseillé de réaliser ce dosage en commençant par le blanc puis en traitant les tubes les uns après les autres (dosage cinétique). Un étalon de 100 µmol/l est utilisé.

	SÉRUM	URINE	ÉTALON	BLANC
Sérum ou étalon	100 µl		100 µl
Urine diluée au 1/10		10 µl
Eau distillée		90 µl		1 ml
Réactif	1 ml	1ml	1ml
Mélanger les tubes, déclencher le chronomètre pour chaque tube au moment d'ajouter le réactif.

• Photomètrer à 490 nm à t = 20 secondes, puis à t = 80 secondes. Le zéro est fait sur le blanc.
• Calcul de la concentration, C étant la concentration de l'étalon :
  SÉRUM : [(différence absorbance patient) / (différence absorbance étalon)] X C
  URINE : [(différence absorbance patient) / (différence absorbance étalon)] X C X 100
• Les mesures sont linéaires de 0 à 1000 µmol / l.

Réactifs :

Réactif de coloration : dissoudre dans 500 ml d'eau distillée :

• 1 gramme d'acide picrique

Réactif alcalin : attention, réactif très irritant pour la peau et les yeux, utiliser masque et gants. Dissoudre dans 500 ml d'eau distillée :

• 8 grammes de soude
• 9.5 grammes de phosphate de sodium

Ces deux réactifs se conservent à température ambiante pendant 6 mois.

Le réactif final est obtenu en mélangeant à partie égale la solution d'acide picrique et celle de soude.

Notes :

• On peut avantageusement utiliser une urine dosée puis ajustée à 100 µmol/l pour se fabriquer son étalon. On l'aliquotera ensuite en capsules de 200 µl que l'on congèlera.
• Un taux de bilirubine supérieur à 42 µmol/l abaisse la concentration en créatinine de 10 µmol/l.

Fiche technique :

CREATININE	Dosage	Cond	Prix	Revend.	Référence	Temps de manipulation	6	mn
						Temps d'incubation	4	mn
Acide picrique	solide	250g	298 F	Fisher	A4713958	Frais d'eau distillée	0.02 F
Hydroxyde de sodium	solide	1 Kg	138 F	Fisher	A4321194	Frais de chauffage	- F
Phosphate de sodium	solide	250g	80 F	Fisher	A4897508	Consommables + étalon	0.20 F
		TOTAL	516 F			Total frais annexes	0.22 F
		pour	26 000	tests		Amortissement photomètre	1.00 F
		soit	17 500	patients		Coût en réactif par test	0.03 F
Coût au test par patient	0.03 F					Forfait technicien	0.50 F
Poids du kit	1,5 Kg					Total général	1.75 F