• Pesée des matières premières
• Étalons et droites d'étalonnage

Pesée des matières premières :

La pesée est un élément important de la fabrication des réactifs de biochimie. On peut distinguer deux classes de pesées :

1- Supérieure à 1 gramme :
On peut utiliser une petite balance électronique monoplateau fonctionnant sur pile, de coût assez modeste (250 FF). Certains modèles garantissent même une pesée jusqu'à 0.1 gramme.

2- Inférieure à 1 gramme :
L'idéal est de posséder une balance type Mettzler monoplateau. Elles fonctionnent habituellement avec l'électricité, qui n'est cependant là que pour éclairer la "diapositive" de lecture des milligrammes. Le courant 220 ou 110 Volts est toujours transformé en faible intensité variant entre 4.5 et 12 volts. En enlevant le transformateur après avoir noté sa tension de sortie et en le remplaçant par un nombre suffisant de piles reliées entre elles pour obtenir cette tension de sortie, la balance fonctionne sans électricité.

Lorsque l'on ne possède pas de balance, le technicien de laboratoire doit aller de temps en temps peser ses matières premières dans un hôpital ou un laboratoire voisin en rapportant dans des petits sachets plastique annotés, plusieurs pesées des substances nécessaires.

Étalons et droites d'étalonnage :

Les étalons sont primordiaux pour de bonnes analyses biochimiques. Il est rare que l'on dispose d'étalons à coût abordable dans les pays en développement. Il est donc impensable de n'utiliser que ces étalons du commerce. Un panachage avec des étalons "maison" est donc nécessaire :

On utilisera des sérums de différents patients, fraîchement prélevés, coagulés et centrifugés que l'on mélangera dans un petit flacon de 60 ml lavé et stérilisé. Le volume total de sérums mélangés doit être au moins de 40 ml
Ce sérum sera aliquoté à raison de 0.5 ml, dans des petits récipients coniques en matière plastique (type Eppendorf.) puis congelé.
On gardera 3 millilitres de ce mélange de sérums sur lequel on dosera 3 fois de suite, à partir d'un étalon du commerce correctement reconstitué, les analytes suivants : protéines totales, l'osmolarité, albumine, bilirubine, calcium, fer, glucose et CRP.

Pour la créatinine et l'urée, on utilisera 30 ml d'une dilution d'urine au 1/10 que l'on dosera 3 fois de suite de la même manière.

Les droites Concentration = f(Absorbance) doivent être effectuées impérativement sur papier millimétré. Ensuite, chaque technicien connaîtra la stabilité de ses droites.